液相色譜(LC)系統(tǒng)故障排查指南
現(xiàn)象:基線隨時(shí)間持續(xù)向上或向下移動(dòng),而非保持水平
流動(dòng)相檢查:
溶劑純度/質(zhì)量:是否使用HPLC級(jí)溶劑?水相是否滋生微生物?
混合均勻性:梯度程序設(shè)置是否正確?是否充分脫氣?
溫度穩(wěn)定性:柱溫箱溫度是否穩(wěn)定?環(huán)境溫度波動(dòng)是否超過(guò)±2℃?
檢測(cè)器檢查:
光源穩(wěn)定性:氘燈/鎢燈使用時(shí)長(zhǎng)是否超過(guò)2000小時(shí)?
流通池:池內(nèi)是否有氣泡?池窗清潔度如何?
色譜柱檢查:是否完成平衡(建議10-30倍柱體積沖洗)?
系統(tǒng)泄漏:檢查所有高壓連接處(建議使用檢漏液)
立即更換新鮮HPLC級(jí)溶劑,使用0.22μm濾膜過(guò)濾
重新配制緩沖鹽溶液,使用pH計(jì)精確校準(zhǔn)
執(zhí)行流通池清洗程序(推薦使用10%稀硝酸30分鐘)
檢查所有管路接頭,重點(diǎn)檢查泵后至進(jìn)樣器段
現(xiàn)象:基線呈現(xiàn)高頻毛刺狀抖動(dòng),噪聲值超過(guò)0.5mAU
氣泡問(wèn)題:流動(dòng)相是否脫氣?溶劑瓶濾頭是否堵塞?
檢測(cè)器光源:是否出現(xiàn)能量輸出波動(dòng)(建議使用內(nèi)置診斷程序檢測(cè))
泵系統(tǒng):?jiǎn)蜗蜷y清洗頻率是否低于推薦值(建議每500小時(shí)清洗)
執(zhí)行三步排氣法:溶劑瓶排氣 → 泵頭排氣 → 流通池排氣
更換檢測(cè)器光源(氘燈建議每2000小時(shí)更換)
使用異丙醇超聲清洗單向閥(40kHz,20分鐘)
現(xiàn)象:系統(tǒng)壓力超過(guò)正常值20%以上或達(dá)到儀器壓力上限
保護(hù)柱/在線過(guò)濾器(80%故障源于此)
色譜柱入口篩板(建議使用20倍放大鏡觀察)
進(jìn)樣系統(tǒng)(檢查定量環(huán)體積是否匹配)
泵出口過(guò)濾器(建議每3個(gè)月檢查)
執(zhí)行分段壓力測(cè)試(斷開(kāi)色譜柱觀察壓力)
反向沖洗色譜柱(流速≤1ml/min,持續(xù)30分鐘)
使用DMF超聲清洗進(jìn)樣針(60℃,30分鐘)
現(xiàn)象:系統(tǒng)壓力低于正常值30%或無(wú)法建立壓力
立即執(zhí)行系統(tǒng)保壓測(cè)試(關(guān)閉所有出口觀察壓力變化)
檢查溶劑瓶液位(建議設(shè)置低液位報(bào)警)
執(zhí)行Purge/Prime程序(建議使用100%甲醇沖洗)
現(xiàn)象:峰不對(duì)稱度(As) > 1.2,后沿呈現(xiàn)明顯平臺(tái)
流動(dòng)相優(yōu)化:添加0.1%三乙胺(堿性化合物)或0.05%醋酸(酸性化合物)
色譜柱維護(hù):執(zhí)行柱再生程序(甲醇:乙腈=1:1,24小時(shí)沖洗)
系統(tǒng)升級(jí):將管路內(nèi)徑從0.010"改為0.005"(可減少30%柱外效應(yīng))
高壓操作:系統(tǒng)壓力可達(dá)6000psi,操作時(shí)必須佩戴防護(hù)眼鏡和手套
化學(xué)品處理:使用有機(jī)溶劑時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)操作
斷電維護(hù):進(jìn)行管路連接/拆卸前務(wù)必關(guān)閉電源并釋放系統(tǒng)壓力
注:本指南建議配合廠商維護(hù)手冊(cè)使用,定期更換消耗品(泵密封圈建議每500小時(shí)更換,進(jìn)樣針密封墊每1000次進(jìn)樣更換)。建議建立設(shè)備維護(hù)日志,記錄壓力、流速等關(guān)鍵參數(shù)變化趨勢(shì)。
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